荧光分光光度法在苯并(a)芘含量测定上的应用
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摘要: 荧光分光光度法是对荧光物质进行定性和定量的有效方法。目前国家标准对于测定苯并(a)芘含量的方法主要以荧光分光光度法为主。其中主要的标准有G B11895-1989《水质 苯并(a)芘的测定 乙酰化荧光分光光度法》、G B/T 5009.27-2003《食品中苯并(a)芘的测定》、G B/T 5750.8-2006《生活饮用水标准检验方法 有机物指标 9.2纸层析-荧光分光光度法》等。
本文依据国家标准G B/T 5009.27- 2003《食品中苯并(a)芘的测定》,应用港东F- 380型荧光分光光度计对食品中苯并(a)芘含量进行测定。结果证明此方法操作简便,线性良好是测定食品中苯并(a)芘含量的理想方法。
关键词: 荧光分光光度法 苯并(a)芘 水质 食品 生活饮用水
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· 原理
试样先用有机溶剂提取,或经皂化后提取,再将提取液经液-液分配或色谱柱净化,然后在乙酰化滤纸上分离苯并(a)芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点,将分离后有苯并(a)芘的滤纸部分剪下,用溶剂浸出后,用荧光分光光度计测荧光强度与标准比较定量。
· 实验条件
仪器及附件:
天津港东 F-380 型荧光分光光度计
荧光石英比色皿
分析条件:
激发波长:365nm
发射波长:406 nm、(406+5)nm、(406-5)nm
药品:
前处理试剂:环己烷(或石油醚)、苯(重蒸馏)、二甲基甲酰胺(或二甲基亚砜)、无水乙醇、乙醇(95%)、无水硫酸钠、氢氧化钾;
层析药品:展开剂(乙醇-二氯甲烷)、硅镁吸附剂、层析用氧化铝(中性)、丙酮;标准溶液:苯并(a)芘标准溶液。
其它:
脂肪提取器、层析柱、层析缸(筒)、K-D全玻璃浓缩器、紫外光灯、旋转蒸发装置、组织捣碎机、回流皂化装置、乙酰化滤纸等。
· 样品的制备
1、样品提取流程图
2、样品的净化流程图
3、样品的分离流程图
· 测定结果
应用F-380型荧光分光光度计的“波长扫描”模块扫描苯并(a)芘的发射谱图,分别读取标准品、样品及样品空白的发射波长为406 nm、(406+5)nm、(406-5)nm的荧光强度,通过公式计算得出样品中苯并(a)芘的含量。
· 总结
采用荧光分光光度法测定食品中苯并(a)芘的含量,操作简单,方法准确,是一种理想的方法。
· 参考资料
GB/T 5009.27-2003《食品中苯并(a)芘的测定》